1. 常规石蜡切片60℃烤片2小时；
2. 脱蜡。二甲苯脱蜡15min，两次；
3. 水化。依次用无水乙醇、95%、90%、80%、70%，各一次2min，之后在蒸馏水中孵育5min；
4. PBS（pH7.4）浸泡5min；
5. 抗原修复：高压修复（EDTA，pH8.0或0.01M枸橼酸钠缓冲溶液，pH6.0高压10-15min），PBS洗2-3min；
6. 3% H2O2去离子水37℃孵育10min，PBS洗；
7. 正常山羊血清封闭，37℃孵育10-20min，勿洗；
8. 适当比例的一抗工作液孵育，4℃过夜或37℃ 1h；
9. 复温20min，PBS洗3min，三次；
10. 二抗孵育：加生物素化标记二抗，37℃，10-15min，PBS洗3min，三次；
11. 三抗孵育：加辣根酶标记的链酶卵白素，37℃，10-15min，PBS洗3min，三次；
12. 加DAB显色剂显色，镜下观察结果，适时终止；
13. 苏木素复染5min，自来水冲洗片刻，75%的盐酸酒精溶液分化30s，自来水冲洗5min蓝化；
14. 脱水。依次经过70%、80%、90%、95%、无水乙醇，各2min，二甲苯15min，三次；
15. 封片，中性树胶封片。
光学显微镜100×或400×观察，拍片。
图象评分。